Đo độ hấp thụ

Từ khóa: Hấp thụ, Đo lường, Hấp thụ, UV, NIR

Hấp thụ là một quá trình ánh sáng tương tác với vật chất. Khi ánh sáng chiếu vào thứ gì đó lấy đi một phần ánh sáng, chúng ta nói về độ hấp thụ. Ánh sáng được hấp thụ không bị mất đi; nó được chuyển thành nhiệt hoặc năng lượng hóa học khi phân tử hấp thụ bị kích thích. Hấp thụ là một quá trình vật lý mà chúng ta bắt gặp hàng ngày khi nhìn thấy màu sắc: Ánh sáng trắng như ánh sáng mặt trời chứa tất cả các màu của ánh sáng khả kiến. Khi nó chiếu lên cỏ xanh, cỏ hấp thụ tất cả các màu trừ màu xanh lục. Ánh sáng xanh lục được phát ra, và đây là thứ mang lại màu sắc cho cỏ.

Từ UV đến NIR và các bước sóng dài hơn, các phép đo độ hấp thụ cung cấp thông tin có giá trị về thành phần hóa học của vật liệu ở mọi trạng thái của vật chất trong sinh học và hóa học. Axit nucleic và protein hấp thụ tia UV, chất diệp lục hấp thụ ánh sáng xanh lam và cam/đỏ và huyết sắc tố hấp thụ ánh sáng vàng lục. Các chất phân tích này có thể được định lượng mà không cần xử lý thêm, ít nhất là nếu chúng được tìm thấy trong dung dịch có độ hấp thụ nền thấp. Tuy nhiên, định lượng độ hấp thụ không giới hạn ở một số ít phân tử hấp thụ. Các phản ứng hóa học hỗ trợ tạo ra các phân tử hấp thụ để định lượng. Những phản ứng này phụ thuộc vào một chất nền cụ thể hoặc vào một loại enzyme. Do đó, sự phát triển màu sắc (và độ hấp thụ) càng mạnh thì càng có nhiều hợp chất/enzim được tìm thấy trong mẫu.

Ánh sáng chiếu vào mẫu có thể được truyền đi, hấp thụ hoặc tán xạ. Độ truyền qua là ánh sáng đi qua mẫu; ánh sáng gặp phân tử có thể bị hấp thụ hoặc tán xạ. Độ hấp thụ có thể được sử dụng như một công cụ định tính để xác định các chất hoặc như một công cụ định lượng để đo nồng độ của một phân tử trong dung dịch.

Ưu điểm của Absorbance – Đo không phá hủy

Trừ khi mẫu của bạn là chất cảm quang, phương pháp đo này có thể được lặp đi lặp lại mà không làm thay đổi mẫu.
Sử dụng độ hấp thụ để xác định nồng độ của các dung dịch. Độ chính xác và độ chính xác lặp lại cao.
Khi có công cụ và phương pháp phù hợp, độ hấp thụ có thể được định lượng với độ chính xác rất cao giữa các lần đo.

Ocean Optics (Ocean Insight) có các công cụ và chuyên môn để cấu hình hệ thống quang phổ cho hàng trăm ứng dụng hấp thụ khác nhau. Định cấu hình hệ thống cho độ hấp thụ đa năng bắt đầu bằng máy quang phổ như Ocean HDX hoặc Flame, cả hai đều bao phủ phạm vi UV-Vis hoặc NIRQuest+ cho NIR.

Những ứng dụng gì thường được đo bằng độ hấp thụ?

Định lượng protein

Nhiều phép đo độ hấp thụ nhằm mục đích xác định nồng độ protein trong dung dịch theo tuần khi đo toàn bộ hàm lượng protein trong mẫu.

Định lượng hạt nhân

Axit nucleic và các thành phần của chúng thể hiện độ hấp thụ tự nhiên ở dải bước sóng. Có thể khai thác phép đo độ hấp thụ của quy trình nhuộm hoặc chuẩn bị mẫu mà không cần chuẩn bị mẫu để xác định nồng độ DNA/RNA nhanh chóng và dễ dàng cũng như đánh giá độ tinh khiết của axit nucleic.

Khả năng di động

Các xét nghiệm so màu báo cáo về tình trạng sức khỏe của tế bào rất phổ biến vì chúng nhanh chóng và tiết kiệm chi phí. Khi sử dụng một tấm vi mạch, nhiều điều kiện có thể được kiểm tra cùng một lúc. Các phương pháp dựa trên khả năng hấp thụ chủ yếu dựa vào khả năng của các tế bào hoạt động trao đổi chất để giảm các chất nền như MTT hoặc Resazurin. Các dạng rút gọn của chúng hiển thị độ hấp thụ ở các bước sóng cụ thể và do đó báo cáo về hoạt động trao đổi chất của mẫu tế bào, một đặc điểm thường bị ảnh hưởng bởi khả năng sống của tế bào.

Video hướng dẫn Absorbance
Cách thiết lập phép đo độ hấp thụ. Xem hướng dẫn cách thiết lập thiết bị của chúng tôi và thực hiện phép đo độ hấp thụ. Các sản phẩm nổi bật bao gồm quang phổ kế Flame, nguồn sáng, phụ kiện lấy mẫu và phần mềm OceanView.

Sử dụng UV Absorbance để giám sát protein một cách liên tục, trực tuyến
Tìm hiểu thêm về theo dõi protein một cách liên tục, trực tuyến sử dụng UV absorbance. Xem cách chúng tôi sử dụng quang phổ kế độ nhạy cao Ocean HDX để ghi lại các giá trị nồng độ protein trong thời gian thực, sau đó chuyển đổi dữ liệu thành các câu trả lời có ý nghĩa đối với người dùng.